1. Làm thế nào để lưu trữ mẫu?

• Khuyến nghị: Sử dụng mẫu tươi khi có thể để đạt được kết quả tốt nhất.
• Lưu trữ thay thế: Lưu trữ ở -20°C, -80°C, hoặc trong ni-tơ lỏng, tùy thuộc vào loại mẫu.

2. Có thể sử dụng các loại mẫu không được khuyến nghị trong hướng dẫn của bộ kit không?

• Có thể: Nếu nồng độ dự kiến của mẫu nằm trong phạm vi động học của bộ kit (tốt nhất là trong phạm vi giữa).
• Rủi ro: Các loại mẫu không được khuyến nghị chưa được xác nhận, vì vậy không thể đảm bảo kết quả chính xác. Nếu sử dụng các loại mẫu này, chính sách trả lại sẽ không còn hiệu lực.

3. Nhiệt độ lưu trữ của bộ kit là bao nhiêu?

• Khuyến nghị: Hầu hết các bộ kit có nhiệt độ lưu trữ là 2-8°C. Tuy nhiên, một số thành phần có thể yêu cầu lưu trữ ở -20°C. Cần tham khảo hướng dẫn của sản phẩm để biết chi tiết. Việc lưu trữ đúng cách sẽ đảm bảo hiệu suất tốt nhất cho bộ kit.

4. Có thể sửa đổi hướng dẫn trong bộ kit không?

• Không khuyến nghị: Bộ kit ELISA đã được tối ưu để cho kết quả tốt nhất trong điều kiện hướng dẫn đã đề ra. Việc sửa đổi có thể làm giảm chất lượng kết quả hoặc gây ra kết quả sai lệch.

5. Có thể sử dụng các thành phần từ các bộ kit khác không?

• Có thể: Có thể sử dụng các thành phần chung từ các bộ kit cùng lô/batch (mặc dù không khuyến nghị), vì kiểm tra chất lượng (QC) được thực hiện cho từng lô cụ thể. Tuy nhiên, mỗi bộ kit được chuẩn bị riêng cho mỗi đơn hàng và các thành phần đã được tối ưu hóa cho bộ kit đó. Không nên sử dụng thành phần từ bộ kit khác hoặc nhà cung cấp khác.

6. Mẫu cần sử dụng bao nhiêu thể tích và nồng độ?

• Thể tích mẫu: Thường là từ 50-100μl, tuy nhiên, có thể thay đổi tùy theo thử nghiệm.
• Khuyến nghị: Nên pha loãng mẫu vào phạm vi giữa của bộ kit để đạt kết quả tốt nhất. Chú ý rằng nồng độ thấp có thể không được phát hiện chính xác, đặc biệt là ở cuối phạm vi thấp của thang đo.

7. Phải làm gì với các mẫu có giá trị ngoài phạm vi động học của thử nghiệm?

• Mẫu có giá trị cao hơn: Cần thử lại với độ pha loãng cao hơn.
• Mẫu có giá trị thấp hơn: Được xem là không thể phát hiện được. Các giá trị ngoài phạm vi chuẩn thường không có tính tuyến tính, vì vậy không thể suy luận chính xác giá trị.

8. Có cần chạy tất cả các mẫu cùng một lúc không?

• Không cần thiết: Vì hầu hết các bộ kit sử dụng microplate dạng dải, có thể sử dụng các dải riêng biệt để phân tích mẫu tại các thời điểm khác nhau.

9. Có cần phải chạy mẫu trắng và chuẩn mỗi lần không?

• Có: Mẫu trắng và chuẩn là cần thiết để tính toán nồng độ của các mẫu và đảm bảo tính tái lập của kết quả.

10. Cần phải chạy mẫu và chuẩn theo lặp không?

• Có: Việc này rất quan trọng để theo dõi độ chính xác của thử nghiệm và tăng độ tin cậy của kết quả. Nên chạy ít nhất hai lần lặp lại, tốt nhất là ba lần (hoặc nhiều hơn).

11. Làm thế nào để đạt được kết quả có thể tái lập?

• Lý do gây biến động: Thời gian ủ, nhiệt độ, kỹ thuật của người sử dụng, việc rửa và kỹ thuật pipet có thể gây biến động. Nên tạo ra đường chuẩn riêng cho mỗi người sử dụng để tăng tính chính xác.

12. Các chuẩn hoạt động tốt nhưng không có tín hiệu từ mẫu?

• Nguyên nhân: Mẫu có thể không chứa chất phân tích mà bạn nghĩ là đang thử nghiệm. Hướng dẫn pha loãng có thể không được tuân thủ, khiến mẫu bị pha loãng quá mức và rơi ra ngoài phạm vi chuẩn.

13. Hiệu ứng ma trận mẫu là gì?

• Giải thích: Hầu hết các mẫu sinh học có chứa một hỗn hợp phức tạp các protein và muối. Các thành phần này có thể giảm khả năng liên kết giữa kháng nguyên và kháng thể, gây tín hiệu sai. Cần sử dụng dung dịch đệm mẫu để giảm tiếng ồn nền và tối ưu hóa tín hiệu thử nghiệm.

14. Có cần sử dụng máy lắc đĩa không?

• Khuyến nghị: Nên sử dụng máy lắc, vì giá trị OD thu được sẽ thấp hơn so với khi không sử dụng máy lắc.

15. Quy trình rửa được khuyến nghị là gì?

• Khuyến nghị: Có thể rửa bằng tay hoặc tự động. Tuy nhiên, cần kiểm tra lại hệ thống định kỳ và đảm bảo không có dư lượng dung dịch trong các giếng. Sử dụng giấy không xơ khi thấm khô đĩa.

16. Khuyến nghị pha loãng nào nếu mẫu đã được chiết tách?

• Lưu ý: Không làm theo pha loãng được khuyến nghị trong hướng dẫn của bộ kit, vì quy trình chiết tách sẽ ảnh hưởng đến nồng độ mẫu. Mức độ pha loãng cần phải được xác định tùy theo từng trường hợp.

17. Làm thế nào để điều chỉnh bước sóng?

• Khuyến nghị: Đặt máy đọc đĩa ở 450nm. Nếu máy hỗ trợ điều chỉnh bước sóng, đặt ở 540nm hoặc 570nm để điều chỉnh khuyết tật quang học.

18. Nguyên nhân chính của tín hiệu nền cao là gì?

• Nguyên nhân: Nguồn gốc chủ yếu là do chất nền bị ô nhiễm hoặc các tác nhân oxi hóa. Việc rửa không đúng cách cũng là nguyên nhân phổ biến. Cần đảm bảo dung dịch rửa đầy đủ và không bị ô nhiễm.